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本產(chǎn)品只適用于科研，不能用于臨床診斷。

實驗方法步驟：
方法
1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。 
10×PCR buffer 
5 μl     dNTP mix （2mM） 
4 μl     引物1（10pM） 
2 μl     引物2（10pM） 
2 μl     Taq酶 （2U/μl） 
1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl） 
1 μl      加ddH2O至 50 μl 

PCR實驗步驟：
①取凍存已裂解的細胞，室溫放置5分鐘使其完全溶解。
②兩相分離 每1ml的TRIZOL試劑裂解的樣品中加入0.2ml的lvfang，蓋緊管蓋。手動劇烈振蕩管體15秒后，15到30℃孵育2到3分鐘。4℃下12000rpm離心15分鐘。離心后混合液體將分為下層的紅色酚lvfang相，中間層以及無色水相上層。RNA全部被分配于水相中。水相上層的體積大約是勻漿時加入的TRIZOL試劑的60%。
③RNA沉淀 將水相上層轉(zhuǎn)移到一干凈無RNA酶的離心管中。加等體積異丙醇混合以沉淀其中的RNA，混勻后15到30℃孵育10分鐘后，于4℃下12000rpm 離心10分鐘。此時離心前不可見的RNA沉淀將在管底部和側(cè)壁上形成膠狀沉淀塊。
④RNA清洗 移去上清液，每1mlTRIZOL試劑裂解的樣品中加入至少1ml的75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制)，清洗RNA沉淀?；靹蚝?，4℃下7000rpm離心5分鐘。
⑤RNA干燥 小心吸去大部分乙醇溶液，使RNA沉淀在室溫空氣中干燥5-10分鐘。
⑥溶解RNA沉淀 溶解RNA時，先加入無RNA酶的水40μl用槍反復(fù)吹打幾次，使其完全溶解，獲得的RNA溶液保存于-80℃待用。 1)紫外吸收法測定先用稀釋用的TE溶液將分光光度計調(diào)零。然后取少量RNA溶液用TE稀釋(1:100)后，讀取其在分光光度計260nm和280nm處的吸收值，測定RNA溶液 濃度和純度。
使用方法：
一、樣品采集：
1、食品樣品：樣品的采集與預(yù)培養(yǎng)按照樣品的采集與預(yù)培養(yǎng)按照菌檢驗要求進行。
2、血液樣品：用無菌注射器抽取受檢者血2mL，注入無菌EDTA2Na(或檸檬酸鈉)抗凝管，立即混勻。
3、糞便樣品：取糞便置于滅菌的收集管中送檢。
4、病灶部位樣品：取部位新鮮滲出物、粘液膿血送檢。
一、稀釋 PCR 陽性對照（以 10E2-10E7 拷貝/μL 這 6 個 10 倍稀釋度為例）
1. 注意：由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高，因此下列稀釋操作一定要在獨立的區(qū)域進行，千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分）。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴散病原，本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽性對照，只提供可以直接使用的 DNA 片段作為陽性對照。
2. 標(biāo)記 6 個離心管，分別為 7，6，5，4，3，2。
3. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 PCR 專用模板稀釋液（用帶芯槍頭，下同）。
4. 在 7 號管中加入 5 μL 1×10E8 拷貝/μL 的陽性對照，充分震蕩 1 分鐘，得1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
5. 換槍頭，在 6 號管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得)，充分震蕩 1 分鐘，得 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用
6. 換槍頭，在 5 號管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照到 5 號管中，充分震蕩 1 分鐘，得 1×10E5 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
7. 重復(fù)上面的操作直到得到 6 個稀釋度的陽性對照。放冰上待用。

正常大鼠腎細胞(EGF受體陽性);NRK49F伊洛馬司他(GM6001)Ilomastat,GM6001,Galardin質(zhì)量規(guī)格：>98%,MMP(基質(zhì)金屬蛋白酶)抑制劑

CSF1R Others Human  CSF1R / MCSF Receptor / CD115 (aa 543-922) 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) 愈創(chuàng)木酚縮水甘油 Guaiacol glycidyl ether質(zhì)量規(guī)格：>98%

T-105AIII型膠原酶(含10mL酶解緩沖液)1mL4-氨基安替比林4-Aminoantipyrine質(zhì)量規(guī)格：AR,分析

SK-MEL-1, 皮膚色素瘤細胞 細胞,CEM細胞 SW579(細胞)N-溴代丁二(NBS)N-bromosuccinimide質(zhì)量規(guī)格：AR

小鼠胚胎成纖維細胞;MEF溶葡球菌酶,溶葡萄球菌酶 Lysostaphin質(zhì)量規(guī)格：BR,5000U/Pack
Many types of cells包裝：5 × 105方(1ml)左西孟坦Levosimendan質(zhì)量規(guī)格：美國進口

GPR114 Others Human  GPR114 細胞裂解液 (陽性對照) 利奈唑酮-d3Linezolid-d3質(zhì)量規(guī)格：美國進口

大鼠破骨細胞完全培養(yǎng)基 100mL13X分子篩(60-80目,氣相、液相色譜柱)Molecular sieves Type 13X質(zhì)量規(guī)格：60-80目,氣相、液相色譜柱

AZ-521細胞 Human gasic cancer cells AZ-521 MEM+10% FBS13X分子篩(80-100目,氣相、液相色譜柱)Molecular sieves Type 13X質(zhì)量規(guī)格：80-100目,氣相、液相色譜柱

IFNA13 Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 IFNA13 / Ierferon alpha-13 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)13X分子篩(40-60目,氣相、液相色譜柱)Molecular sieves Type 13X質(zhì)量規(guī)格：40-60目,氣相、液相色譜柱
整合SV40基因的上皮細胞;HBL-100 [HBL100]鈮標(biāo)準(zhǔn)溶液(1000μg/ml)Niobium standard質(zhì)量規(guī)格：1000μg/ml

DNASE1 Others Human  DNASE1 / Deoxyribonuclease I / DNL1 細胞裂解液 (陽性對照) 鎳標(biāo)準(zhǔn)溶液(100μg/mL，基體:1%HNO3)Nickel Standard質(zhì)量規(guī)格：100μg/mL，基體:1%HNO3

CL-0384MDA-MB-468-06(癌細胞)5×106cells/瓶×2鉀標(biāo)準(zhǔn)溶液(500mg/L,溶劑：水)Potassium standard質(zhì)量規(guī)格：500mg/L,溶劑：水

Mv1Lu細胞，貂肺上皮細胞 紅白細胞細胞,HEL細胞 皮膚成纖維細胞;HSAS4鉀標(biāo)準(zhǔn)溶液(1000μg/mL,基體:1%HCl) Potassium Solution質(zhì)量規(guī)格：1000μg/mL,基體:1%HCl

鯉魚尾鰭細胞;YZ16鐠標(biāo)準(zhǔn)溶液(1000μg/ml)Praseodymium standard質(zhì)量規(guī)格：1000μg/ml
海馬趾神經(jīng)細胞cDNAHN-h cDNA吡羅昔康-d3Piroxicam-d3質(zhì)量規(guī)格：美國進口

PRKAR1A Others Human  PRKAR1A / PRKAR1 / PKR1 細胞裂解液 (陽性對照) 泊沙康唑-d4Posaconazole-d4質(zhì)量規(guī)格：美國進口

T739小鼠肺腺株;LA795利福昔明標(biāo)記d6Riimin - Labeled d6質(zhì)量規(guī)格：美國進口

HCCC-9810細胞，亞力山大細胞 APP-PS1(C410Y)雙基因轉(zhuǎn)染細胞株,7WCY1.0細胞 中國倉鼠卵巢細胞(亞系克隆);CHO-HCV-E2羅匹尼羅N-氧化物Ropinirole N-Oxide質(zhì)量規(guī)格：美國進口

Lec1(倉鼠卵巢細胞) 5×106cells/瓶×23-氧羅匹尼羅鹽酸鹽3-Oxo Ropinirole 質(zhì)量規(guī)格：美國進口

實驗注意事項：
1）RT-PCR可以檢測組織、細胞、血液、細菌等很多材料，不同的樣本有不同要求，實驗前請充分溝通確認(rèn)實驗方案和樣本情況；
2）客戶盡可能提供實驗的背景信息、物種、基因準(zhǔn)確的名稱和ID號；
3）客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4）樣本保存于液氮或干冰，也可以保存于Trizol液中。
實時熒光定量PCR（quantitative real-time PCR，qPCR）是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團，利用熒光信號積累實時監(jiān)測整個PCR進程，*通過標(biāo)準(zhǔn)曲線對未知模板進行定量分析的方法。實時熒光定量PCR的化學(xué)原理包括探針類和非探針類兩類，探針類是利用與靶細胞序列特異性雜交的探針來指示擴增產(chǎn)物的增加，非探針類是利用熒光染料或者特異性設(shè)計的引物來指示擴增的增加。運用該技術(shù)可以對DNA、RNA樣品進行定量（包括*定量和相對定量）和定性分析。
諾如病毒G1型探針法熒光定量RT-PCR試劑盒主要服務(wù)：DNA或RNA的*定量分析、基因表達差異分析、基因分型。
主要技術(shù)：引物設(shè)計、RNA提取、cDNA合成、qPCR